照应面法酶解藜麦卵白制备α

二、照应制备胰卵白酶照应面优化妄想

（1）照应面妄想及服从

照应面试验服从见表4，面法酶解接管Des远nExpert8.0.6软件对于表4中数据妨碍方差、藜麦卵白清晰性合成，照应制备服从见表5。面法酶解

以酶解光阴、藜麦卵白pH、照应制备温度、面法酶解加酶量为照应变量，藜麦卵白α-淀粉酶活性抑制率为照应值，照应制备经由照应面回归方程合成可知，面法酶解藜麦多肽液具备α-淀粉酶活性抑制率的藜麦卵白多元二次拟合回归方程为：

Y=44.09+2.53A一1.87B+4.39C+4.47D+1.86AB+1.61AC+7.67AD+9.20BC+1.90BD一4.19CD一9.11A²—12.84B²—1.78C²—9.79D²。

19CD一9.11A2—12.8482—1.78C2—9.79D2。照应制备

由表5可知，面法酶解模子的藜麦卵白P＜0.0001，展现模子回归差距极清晰，失拟项P=0.8453＞0.05，不清晰，剖析拟合水平精采，能着实反映实际情景，模子坚贞；模子回归抉择系数R²=0.9728＞0.9，剖析α-淀粉酶活性抑制率服从与方程预料服从具备不同性，模子相关度好。试验模子校对于系数R_Adj²=0.9457，表明模子拟合水平较高。剖析有94.57％试验服从值可能用此模子来声名，因此服从坚贞，模子可能对于α-淀粉酶活性抑制率值妨碍合成以及预料。由回归方程式中一次项系数可知，各因素对于α-淀粉酶活性抑制率熏染巨细挨次为；加酶量(D)＞温度(C)＞酶解时问(A)＞pH(B)。

（2）照应面合成与条件优化

照应面曲线合成，各因素问等高线图以及交互熏染见图6。

由图6可知，pH与光阴、温度与pH、加酶量与温度交互熏染的清晰性与表5中交互项P值的合乐成果不同。a，c，e均呈椭圆形，表明因素问交互熏染清晰，等高线的形态可能分说交互熏染的强弱，3组等高线图中加酶量与温度交互熏染最佳，等高线中的曲线环抱着照应面在中问处组成极点，即抑制率最大值。a，c，e照应面图启齿都朝下，随着每一个因素值的削减而照应值增大，在抵达照应值最高点后，随着因素值的增大而照应值减小，照应面的极点即为最大照应值。

经DesignExpert8.0.6软件合成患上到优化条件为：酶解光阴2.22h、pH8.9五、温度60℃、加酶量0.53×10⁴U／g，在此条件下，旷淀粉酶活性抑制率的实际最大值为47.82％，接管这一服从并散漫实际条件，将酶解条件改为：酶解光阴2h、pH9.0、温度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，患上到的试验服从为45.54％，与实际预料值根基不同，建树的模子可能较好地反映藜麦多肽液具备抑制α-淀粉酶活性的能耐，同时多肽患上率为63.54％。

三、论断

以藜麦卵白为试验质料，钻研酶解后的多肽对于α-淀粉酶活性的抑制率，筛选出最适用酶。在单因素酶解条件下，抉择酶解光阴、pH、温度、加酶量妨碍Box-Behnken试验妄想，优化服从展现：加酶量以及酶解温度对于α-淀粉酶活性的抑制作用比pH以及酶解光阴要强。试验服从表明：制备藜麦多肽的最佳提取工艺为：酶解时问2h、pH九、温度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，在此条件下α-淀粉酶活性抑制率为45.54％。为了后退多肽液对于α-淀粉酶的活性抑制作用，还需对于酶解多肽液妨碍进一步的纯化处置。

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